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    紫外分光光度計(jì)使用測(cè)試誤區(qū)

    來源:http://www.331723.com時(shí)間:2021-03-09點(diǎn)擊:0次

           紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器。那么使用測(cè)試時(shí)有哪些注意的地方?

           一、復(fù)色光對(duì)朗伯-比爾定律的偏離

           朗伯-比爾定律成立的前提條件是入射光是單色光,但是精度再高的儀器,即使是雙單色器的分光光度計(jì),也只能獲得近乎單色的光,無法獲得純單色光,它仍然含有狹窄光通帶,具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會(huì)導(dǎo)致朗伯-比爾定律的正或負(fù)偏離。

           固定狹縫的紫外分光光度計(jì)光譜帶寬一般為1nm或2nm,可調(diào)狹縫的可以做到0.Inm;可見分光光度計(jì)帶寬6nm、甚至十幾納米。

           光譜帶寬應(yīng)該是越小越好,但是隨著光譜分辨率的提高,儀器的靈敏度降低,所以選擇儀器時(shí)要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時(shí),可近似認(rèn)為符合朗伯-比爾定律定律。

    紫外可見分光光度計(jì)

           二、雜散光的影響

           雜散光是指進(jìn)人檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬范圍外的其他波長(zhǎng)組分,它是光譜測(cè)量中誤差的主要來源。

           產(chǎn)生原因:分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊緣波長(zhǎng)處,由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測(cè)器靈敏度都較低,雜散光的影響更為顯著。

           雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測(cè)量誤差,實(shí)際工作中,在定量分析時(shí),一般在吸收峰或其附近處測(cè)量樣品吸光度,如果在分析波長(zhǎng)處含有雜散光,這時(shí)樣品的透光率較小,而雜散光大部分透過,使測(cè)量吸光度低于真實(shí)吸光度。

           三、儀器噪聲對(duì)測(cè)T的影響

           儀器噪聲也是儀器的一個(gè)重要指標(biāo),它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測(cè)量的分析信號(hào)中的不需要的信號(hào),掃描100%T和0%T線,可觀察到分光光度計(jì)的噪聲水平,如果儀器噪聲較大,會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào),一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。

           四、波長(zhǎng)和吸光度準(zhǔn)確度

           樣品的每一個(gè)值都是在一定的波長(zhǎng)下測(cè)得的,如果波長(zhǎng)誤差很大,測(cè)出的值肯定不準(zhǔn)。吸光度準(zhǔn)確度也是用戶對(duì)儀器的直接要求,更應(yīng)引起足夠的重視。

           國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計(jì)透射比準(zhǔn)確度為A級(jí)士0.6%, B級(jí)土1.0%。